凍存袋的基本原理

利用細胞凍存的形式來購買、寄贈、交換和運送某些細胞。 細胞凍存時向培養(yǎng)基中加入保護劑--終濃度5%．15%的甘油或DMSO，可使溶液冰點降低，加之在緩慢***條件下，細胞內(nèi)水分透出，減少了冰晶形成，從而避免細胞損傷。 采用"慢凍快融"的方法能較好地保證細胞存活。標準冷凍速度開始為-1 到 -2℃/min，當溫度低于-25℃時可加速，到-80℃之后可直接投入液氮內(nèi)(-196℃)。

凍存袋的使用注意事項

1. 如用液氮罐存放樣品，包裹***的鋁箔或冷凍保存管轉入樣本袋時，請按以下步驟進行：把樣本袋（紗布袋等）放入液氮中冷凍一下，而后將液氮冷卻的***放入樣本袋

2. 如用廣口容器液氮暫存，建議用進口高質量凍存管，油性筆標記后，樣品迅速放入管中，擰緊后迅速放入液氮中。然后再轉移到超低溫冰箱中保存。

3．直接干冰中保存并郵寄的，建議全部用進口凍存管，油性筆標記后，樣品迅速放入經(jīng)干冰預冷的凍存管中，放入樣品袋，CS50凍存袋多少錢，埋入干冰中，密封包裝后，運輸。

細胞凍存復蘇方法

1.  細胞實驗室進行常規(guī)消毒，紫外照射40min以上。

2.  培養(yǎng)液（DMEM）、0.25％胰蛋白酶（Trypsin）恒溫水浴箱37°C預熱20min，備用。

3.  二亞砜（DMSO)在40°C冰箱中冷藏30min，CS250凍存袋多少錢，備用。

4.  從液氮保存罐中取出凍存管，立即放入400°C水浴中，凍存袋多少錢，快速搖晃，直至凍存液完全融化。

5.  將細胞懸液移入15ml離心管，緩慢加入4ml培養(yǎng)液，離心（1000r/min，5min）。

6.  用培養(yǎng)液懸液混懸沉淀細胞，調整細胞濃度，方培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

7.  記錄復蘇日期。

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