凍存袋方法的改進(jìn)
自1977年以來，CS50凍存袋報價，我們應(yīng)用四級梯度降溫凍存法對30余株哺乳動物細(xì)胞及2株節(jié)肢動物細(xì)胞共1000多支安瓶進(jìn)行了冷凍保存，效果較好，大部分細(xì)胞的活存率在70%以上。在此基礎(chǔ)上對8株抗登革4型(DEN一4)病毒雜交瘤細(xì)胞400多支安靚進(jìn)行了凍存。鑒于四級降溫凍存法步驟多，200-074-400凍存袋報價，需要經(jīng)過4℃冰箱和一20℃冰箱長達(dá)7~8小時的梯度降溫，200-074-401凍存袋報價，較難適應(yīng)單工作中細(xì)胞凍存的需要。因此，自1982年以來我們摸索了影響細(xì)胞凍存的主要因素，確定了雜交瘤細(xì)胞凍存的適保護(hù)劑濃度(1.2〕，并研制成功細(xì)胞凍存簡易裝置。
凍存袋技術(shù)
是將細(xì)胞放在低溫環(huán)境，減少細(xì)胞代謝，以便長期儲存的一種技術(shù)。細(xì)胞凍存是細(xì)胞保存的主要方法之一，起到了細(xì)胞保種的作用。利用凍存技術(shù)將細(xì)胞置于-196℃液氮中低溫保存，可以使細(xì)胞暫時脫離生長狀態(tài)而將其細(xì)胞特性保存起來，這樣在需要的時候再復(fù)蘇細(xì)胞用于實驗。而且適度地保存一定量的細(xì)胞，海淀區(qū)凍存袋報價，可以防止因正在培養(yǎng)的細(xì)胞被污染或其他意外事件而使細(xì)胞丟種，起到了細(xì)胞保種的作用。
凍存袋實驗前的準(zhǔn)備
生長良好之培養(yǎng)細(xì)胞、新鮮培養(yǎng)基、DMSO、無菌塑料冷凍保存管(Nalgene 5000-0020)、等速降溫機(jī)
冷凍方法理論準(zhǔn)備:
(1)傳統(tǒng)方法:冷存管置于4℃10分鐘--->-20℃30分鐘--->-8O℃16~18小時(或隔夜)--->液氮槽長期儲存。-20℃不可超過1小時，以防止胞內(nèi)冰晶過大，造成細(xì)胞大量消失，亦可跳過此步驟直接放入-8O℃冰箱中。
(2）程序降溫:利用已設(shè)定程序的等速降溫機(jī)以-1~-3℃/分鐘之速度由室溫降至（-8o℃以下) -120℃，再放在液氮槽長期儲存。適用于懸浮型細(xì)胞與hybridoma之保存。
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