既要充分保留被測核酸，（特別是RNA）不被降解，植物原位雜交服務公司，又要盡可能維持原有***或細胞的形態(tài)結構。

步驟：基本與免1疫***化學技術相似，即***要求新鮮和迅速投入固定液。固定液為4%多聚甲醛/0.1 M PBS（PH7.0-7.6），含有1/1000 DEPC。標本較大時用刀片切成厚度不超過4mm的小塊，固定1小時即可，較大的標本固定不要超過2小時。某些***對過度固定尤其敏感，如動物大腦，固定時間30-40分鐘，一般不要超過1小時。取材過程中避免手指、唾液和未經RNA酶***處理的器具接觸標本。冷凍切片以厚5~30um佳，40℃烤箱內干燥2小時后儲存在-80℃超低溫冰箱，在-20℃可保存２～３周，在-70℃可保存數月之久。

點對點酵母雙雜交驗證實驗流程

1、誘餌蛋白毒性及自激1活檢測；

2、共轉化：分別將誘餌/捕獲質粒（pGBKT7-Bait/pGADT7-Prey）、陽性對照質粒（pGBKT7-p53/pGADT7-T）、陰性對照質粒（pGBKT7-Lam/pGADT7-T）分別共轉到Y2H Gold感受態(tài)細胞中，涂布于DDO平板培養(yǎng)；

3、點板驗證：分別從平板上挑單克1隆稀釋10倍、100倍、1000倍，然后點板到TDO/X/A和QDO/X/A固體培養(yǎng)基進行驗證；

4、實驗數據與報告整理。

原理

原位雜交技術是在一定的溫度和離子濃度下，使具有特異序列的單鏈探針通過堿基互補規(guī)則與***細胞內待測的核酸復性結合而使得***細胞中的特異性核酸得到***，并通過探針上所標記的檢測系統(tǒng)將其在核酸的原有位置上顯示出來。

經特定標記的核苷酸鏈為探針，可與***切片、細胞或染色體標本中的待檢DNA片段或mRNA進行雜交，然后顯示標記物，從而分析待檢核酸的分布和含量。利用此項技術可研究各種***在染色體上的***，編碼某種蛋白質的mRNA在胞質中的表達。