難點與關(guān)鍵點

將灌注針插入主動脈內(nèi)是灌注固定的關(guān)鍵，也是難點。首先準(zhǔn)確找到主動脈，這是此步驟的要點?？捎脺厣睇}水將胸腔內(nèi)的血液沖洗干凈，用鑷子輕輕夾住心 外膜（夾的越少越好，以免影響取材）將心臟向左上方提起，即可看清主動脈，又可使灌注針很容易地插入主動脈內(nèi)。插入時動作要慢，動物模型實驗，針尖方向不要偏向右側(cè)，以 免刺入右心房，如果感到有阻力，則將針退后、調(diào)整方向重新進針，直到進入主動脈，灌注針進入主動脈后可在心臟的上方看到其位置，灌注針進入主動脈的長度 好為 3~5 毫米，然后用絲線扎緊。切勿將灌注針放在左心室內(nèi)，這樣由于主動脈瓣的關(guān)閉，灌注液很難進入主動脈，而是沿著心室的切口流出，致使灌注失敗。另 外，灌注針插入成功后，一定要用剪刀剪開右心耳而不是右心室，這是灌流液的出口。剪開心尖的位置一定要掌握好，實驗動物模型公司，不能偏右使灌注針插入右心室。

五、注意事項

1．  小宮設(shè)備和實驗程序與大鼠類似，但迷宮規(guī)格應(yīng)比大宮小，以免增加小鼠行為操作難度。

2．  本實驗也可只用來測定工作記憶。方法中不同的是，在所有臂均放置食粒，臨床前動物實驗，而不是只選4個臂放置食粒。

3．  慢性應(yīng)激對動物的迷宮操作可產(chǎn)生影響，動物實驗，且存在性別差異。經(jīng)過慢性應(yīng)激以后，雄性大鼠***減弱，表現(xiàn)為記憶錯誤頻率增加；雄性大鼠的空間記憶反而增強，表現(xiàn)為錯誤頻率減少。

4．  即使在限制進食條件下，也應(yīng)讓大鼠體重每周增加5g，以免動物因營養(yǎng)不良而患病。剔除身體狀態(tài)不良的動物。

5．  迷宮周圍的任何一件物品均可被動物用來作為空間定為的標(biāo)志。去除或移動這些標(biāo)志可能使動物操作困難并降低迷宮臂選擇的準(zhǔn)確性。

6．  八臂迷宮實驗方法根據(jù)實驗?zāi)康牡牟煌詫m臂的數(shù)目可不同，包括8、16、24、32、40和48臂迷宮。迷宮臂越少要求動物記住探究過的臂也越小，動物的行為操作就越簡單。增加臂的數(shù)目一方面增加了對動物空間記憶的要求，另一方面也引入了更多的、有必要考慮的干擾因素（例如過去的迷宮學(xué)習(xí)對目前所測記憶的影響）。所以，通常使用8臂迷宮，既可減少不必要的、過多臂的干擾，又可縮短訓(xùn)練和測試所花的時間。

7．  所用食物通常為小塊的、帶巧克力味（動物喜歡的味道之一）或甜味的早餐圈（每塊10mg）；也可用液體食物（如巧克力奶或水）。后者對于測試某些影響動物對固體食物吞咽的尤為實用。

8．  影響動物迷宮操作主要有兩大因素：對迷宮或觀察者的恐懼與動物探究習(xí)性和已知放在迷宮臂內(nèi)食物的驅(qū)使?？謶忠蛩剡^強會阻止動物的迷宮操作，使動物始終停留在迷宮的某一個地方而不去探究。缺乏對食物的渴求也會產(chǎn)生類似結(jié)果，增加對動物的撫摸，必要時加高迷宮臂的側(cè)墻，有助于減少動物的恐懼。如食物的驅(qū)使作用不足，可減少食物量，但必須同時監(jiān)測體重和一般身體狀況。通常大鼠體重不應(yīng)低于禁食前的80%；對多數(shù)大鼠，體重降低15%即可。

9．  與水迷宮不同，臂迷宮適合反復(fù)測試或長期記憶的測試。一般認為，工作記憶代表短期記憶，參考記憶代表長期記憶。

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