注意事項：

1. 質粒 DNA：請用能夠去除內毒0素的方法制備高質量的質粒 DNA。

2. 稀釋液：0.85%（W/V）生理鹽水，用低內毒0素純水配制，高壓消毒或除0菌過濾。

3. 培養(yǎng)基：經過 DMEM、RPMI-1640 和 M199 等常規(guī)培養(yǎng)基測試，推薦使用含 5~10%牛血0清的

DMEM，若轉染效果不理想可嘗試其它培養(yǎng)基。

4. 以 24 孔細胞板轉染實驗為例，推薦每孔低內毒0素質粒 DNA 用量為 2μg、轉染***用量為 3~5μl，請

在正式實驗前根據不同細胞和不同培養(yǎng)基用報告***進行優(yōu)化。

5. 如果實驗目的在于篩選抗藥性穩(wěn)定細胞系，可在細胞傳代后尚未貼壁時直接進行轉染，從而可節(jié)省

18~24 小時的轉染前細胞培養(yǎng)時間。

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使用方法

1. 將新鮮消化的 BHK-21 細胞接種到 24 孔細胞板中，每孔 1~2×105細胞，pei轉染***，1ml 完全培養(yǎng)基。備注：可在生長旺盛的細胞傳代后直接按下述步驟 2~5 進行轉染，無需 18~24 小時的等候時間。

2. 將 2μg 質粒 DNA 和 3~5μl 轉染***分別稀釋到 50μl 生理鹽水中。備注：質粒 DNA 和轉染***的***適用量需要根據不同培養(yǎng)基來優(yōu)化，但理論上不超出 1~2μg 和 3~5μl 范圍。

3. 合并上述兩溶液并混勻。備注：無需其它轉染***所需的 10~30 分鐘的等候時間。

4. 將上述復合物直接加入到細胞培養(yǎng)基中，用加樣器吸打混勻。備注：轉染復合物可直接加入含血0清的細胞培養(yǎng)基中進行轉染。

5. 將細胞板移至 37oC/5% CO2 孵箱中進行培養(yǎng)。備注：無需在轉染后 4~6 小時補加血0清或更換培養(yǎng)基。

6. 24~72 小時后根據實驗需要進行瞬時表達分析或穩(wěn)定細胞系加壓篩選。

北京博奧龍免0疫技術有限公司是一家由留學歸國人員創(chuàng)辦的生命科學領域高新技術企業(yè)，專0業(yè)從事新型生化***的研發(fā)和銷售。公司理念是通過自主創(chuàng)新的品牌產品改變傳統(tǒng)實驗模式，使生命科學研究變得更輕松、更高0效。公司成立八年多來推出了上萬種自主品牌產品，其中包括QuickAntibody?免0疫佐劑、QuickShuttle?轉染***、QuickFreezing?細胞凍存液、QuickVerification?膠體金檢測卡、Hybridoma Feeder添加因子和Pan-HPV? HPV L1抗0體等多種獨0特的自主知識產權產品。秉承“專0業(yè)、創(chuàng)新”的理念，公司將繼續(xù)在擅長專0業(yè)領域做強做大，為客戶提供更多的創(chuàng)新0產品和服務，力爭成為國際知0名的品牌生化***公司。




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