如何避免細(xì)胞抱團(tuán)？1，用無鈣鎂平衡鹽溶液洗滌細(xì)胞。2，對于貼壁非常牢固的細(xì)胞（如MDCK），為了細(xì)胞更好的狀態(tài)，更漂亮的樣子，建議分多批多次消化，這樣才能大限度地將胰酶對細(xì)胞的損傷降到低，保證細(xì)胞的狀態(tài)能夠優(yōu)。3，消化過程中不要使勁搖動培養(yǎng)瓶，這樣細(xì)胞特別容易成屑樣脫落。細(xì)胞一旦脫落入懸液里就很難再將他吹打成單個（因?yàn)榧?xì)胞沒有受力點(diǎn)了，所以細(xì)胞很難分散開）。所以必須要在細(xì)胞未脫落之前將其吹打開，嚴(yán)格控制好消化程度。

CFSE是一種可穿透細(xì)胞膜的熒光染料，具有細(xì)胞膜通透性，能夠自由進(jìn)入細(xì)胞；當(dāng)CFSE擴(kuò)散穿過細(xì)胞膜，會與細(xì)胞內(nèi)源酯酶產(chǎn)生水解反應(yīng)而被激發(fā)，發(fā)出綠色熒光，這些帶熒光的CFSE會進(jìn)一步與細(xì)胞骨架蛋白結(jié)合，形成穩(wěn)定的胞內(nèi)熒光蛋白。每當(dāng)細(xì)胞進(jìn)行分裂增殖，胞內(nèi)熒光蛋白會被平均分配到下一代細(xì)胞中，因此細(xì)胞熒光強(qiáng)度會隨著增殖代數(shù)增加而不斷地降低，可用流式細(xì)胞儀進(jìn)一步偵測分析得出細(xì)胞分裂增殖的情況。CFSE的濃度，對于終判斷細(xì)胞增殖結(jié)果有直接性的影響！

細(xì)胞***的常見表現(xiàn)：1.細(xì)胞生長緩慢 ：細(xì)胞周期緩滯或是停滯都是***細(xì)胞的基本特征，此時細(xì)胞周期主要停滯于G1期。2.表面分泌物會增多：細(xì)胞***時顯微鏡下可見小黑點(diǎn)，但是小黑點(diǎn)增加，也有可能與培養(yǎng)條件如pH，生物污染等有關(guān)。3.細(xì)胞形態(tài)改變：如細(xì)胞體積增大、細(xì)胞扁平、胞核與核仁體積增加，如果是貼壁細(xì)胞，其細(xì)胞表面會明顯觀察到比較臟，運(yùn)用常規(guī)HE染色結(jié)果會發(fā)現(xiàn)，細(xì)胞表面有很多附著的臟物，細(xì)胞形態(tài)與剛開始培養(yǎng)的細(xì)胞外觀明顯不同，像是上皮細(xì)胞等可能會出現(xiàn)很多梭狀形態(tài)，且細(xì)胞質(zhì)突起等形狀異常細(xì)胞。